詳細分析大鼠ELISA檢測試劑盒的樣本處理及要求

發布時間：2021-07-27 點擊次數：1648次

　　大鼠ELISA檢測試劑盒是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存，操作簡便，結果判斷較客觀等因素，已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。

　　大鼠ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求：

　　1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心；

　　2、血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心；

　　3、尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行；

　　4、細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心；

　　5、組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用；

　　6、標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融；

　　7、不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

　　實驗備注：

　　1、用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底；

　　2、每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是最后加底物溶液及終止液。測量時先用此孔調OD值至零；

　　3、為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜；

　　4、未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液；

　　5、建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。