這么操作昆蟲elisa檢測試劑盒，的得到你想要的結果

發布時間：2018-09-26 點擊次數：2454次

　　1、準備：從冰箱取出試劑盒，室溫復溫平衡30分鐘。

　　2、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

　　3、加標準品和待測樣本：取足夠數量的酶標包被板，固定于框架上，分別設置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔，記錄各孔位置，在標準品孔中加入標準品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL（即樣本稀釋5倍）；空白對照孔不加。

　　4、溫育：37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。

　　5、洗板：棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板4次（也可用洗板機按說明書操作洗板）。

　　6、加酶標工作液：每孔加入酶標工作液50μL，空白對照孔不加。

　　7、溫育：重復4的操作。

　　8、洗板：重復5的操作。

　　9、顯色：每孔先加入顯色劑A液50μL，再加入顯色劑B液50μL，37℃避光顯色15min。

　　10、終止：取出酶標板，每孔加終止液50μL，終止反應（顏色由藍色立轉黃色）。

　　11、測定：以空白孔調零，在終止后15分鐘內，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）。

　　12、計算：根據標準品的濃度及對應的OD值，計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣本的OD值，在回歸方程上計算出對應的樣品濃度，也可以使用各種應用軟件來計算。終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數。

　　昆蟲elisa檢測試劑盒注意事項：

　　1、實驗嚴格按照說明書的操作進行，實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。

　　2、酶標包被板開封后如未用完，應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。

　　3、建議昆蟲elisa檢測試劑盒所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測，取平均值，以減小實驗誤差。

　　4、牢記樣本已經稀釋5倍，計算結果乘以5才是樣本實際濃度。

　　5、本試劑盒定量范圍為0.1-200ng/ml，超過此范圍，為標準曲線延伸計算所得，不做為準確定量結果，請用特殊稀釋液稀釋后測定準確結果（0.1-200ng/ml范圍內），乘以總稀釋倍數即為樣本終濃度。

　　6、若顯色過淺，可適當延長底物溫育時間。

　　7、為避免交叉污染，標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭；酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復使用封板膜。

　　8、試劑盒保質期內使用，不同批號的試劑不得混用。

　　9、底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。