上海仁捷生物人Tau蛋白（Tau）ELISA試劑盒的靈敏度怎么樣？

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人Tau蛋白（Tau）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人Tau蛋白（Tau）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒性能

1.  檢測范圍：75 pg/mL – 2400 pg/mL。

2.  靈敏度：檢測濃度小于10 pg/mL。

3.  特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.  重復性：板內變異系數小于10% ，板間變異系數小于15% 。

實驗結果計算

以所標準品的OD值為橫坐標，標準品的濃度值為縱坐標，在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

而配對抗體作為核心試劑，是實驗的關鍵因素，是真正意義上的CP。并非所有抗體都能應用于ELISA應用，必須對單個抗體進行評估。首要關注抗體識別的免疫原區域輔助抗體對的選擇。對于雙抗夾心法CP選擇有竅門，其中一個抗體作為捕獲抗體包被在多孔板表面，固定抗原。另一個則被偶聯，用于抗原的檢測。兩個抗體必須與同一抗原不同表位發生反應。即如果抗原通過捕獲抗體固定在平板上，那么檢測抗體必須能夠與其他表位相互作用，而不會受到捕獲抗體或平板的位阻。目前市面上也有很多供應商提供驗證過夾心法ELISA的抗體對，可以依據實際情況選擇。